即使存在微量微生物，也可能损害产品的安全性和有效性，进而可能导致患者出现不良反应。为确保无菌性而采取的严格措施，有助于防范这些风险，维护药品质量。

什么是无菌？

无菌指完全不存在所有存活微生物。这是一个绝对术语 —— 即某物要么无菌，要么非无菌，无法直接测量。相反，无菌通过一系列除菌工艺来保证，这些工艺可杀灭所有微生物，包括细菌芽孢等抵抗力最强的形式。这些工艺包括：

物理去除 ：通过过滤等方法从产品中去除微生物。

无菌灌装 ：确保产品在无污染物环境中进行灌装。

物理灭活：利用高温、辐射或其他物理方法杀灭微生物。

最终灭菌：产品放行前进行的最后一道灭菌步骤。

去热原：去除产品中热原（致热物质）以保障患者安全的过程。

无菌检验：保障产品安全

对于无法进行最终灭菌的产品（如无菌灌装产品或热敏性产品），无菌检验是监管要求的必要环节。无菌检验的两种主要方法为：

薄膜过滤法：将产品通过薄膜过滤器，截留微生物以便后续分析。

直接接种法：将产品样品直接加入培养基，若存在微生物则会在培养基中生长。

各国药典规定了无菌检验的具体条件，包括使用两种培养基：TSB（20-25°C 培养）和FTM（30-35°C 培养）。两种培养基均需至少培养 14 天，随后通过目视检查浊度（浑浊度）判断是否存在微生物生长。

无菌检验的局限性

尽管无菌检验是保障产品安全的核心手段，但它并非毫无局限。多个因素会影响无菌检验结果：

生长条件：无菌检验仅能检测在特定测试条件（如所选培养基和培养温度）下可生长的微生物。在这些条件下无法培养的微生物可能会被遗漏。

样品量：样品量过小时可能出现假阴性结果。例如，若某一批次产品的污染率为 5%，但仅测试 10 个样品，检测到污染的概率会很低。

活的非可培养（VBNC）微生物：部分微生物处于存活但无法在标准培养基上生长的状态，常规无菌检验方法难以检测到这类微生物。

无菌检验失败的调查

无菌检验失败必须立即且彻底地处理，以保护公众健康并确保产品质量。调查过程应遵循结构化、系统化的方法：

视失败为真实事件：避免假设失败由实验室误差导致。每一次失败都应被严肃对待并开展严格调查。

启动隔离程序：若检测到微生物生长，受影响批次应立即隔离，在问题完全查明前禁止流通。

开展全面调查：应组建跨职能调查团队（包括微生物学家、质量控制人员和生产人员）分析失败原因。关键调查步骤包括：

污染物培养与鉴定 ：采用基因型方法鉴定涉及的微生物，并评估其可能的来源。

审查环境监测数据：将测试结果与环境监测记录对比，排查潜在污染来源。

检查控制程序：审查阴性对照测试结果，评估测试期间控制环境的完整性。

影响无菌检验结果的因素

生产过程中的多个因素可能导致无菌检验失败，包括：

原材料完整性：微生物污染可能通过原材料引入，因此必须评估来料的微生物负载量和完整性。

工艺异常：审查批次记录，查找可能影响产品无菌性的偏差或异常情况。

无菌灌装风险：人为干预是无菌灌装过程中的重要风险点。因此，必须全面评估无菌灌装的各个方面，包括人员培训、设备功能和洁净室条件。

结论

无菌是制药生产中不可或缺的环节，对保障医疗产品的安全性和有效性起着关键作用。清晰理解无菌要求、测试方法和调查流程，对于防范污染、保护公众健康至关重要。

制药行业必须保持警惕，在整个生产过程中持续监测无菌水平，并在发生失败时开展彻底调查。通过培育质量保证和严格调查的文化，企业不仅能遵守监管要求，还能提升产品质量和患者安全性。

通过持续关注无菌保障，行业可最大限度降低污染相关风险，最终守护全球患者的健康福祉。

来源：药检社